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同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒的使用方法

來源:http://qjjsrd.com/news1068375.html 發(fā)布時(shí)間:2025/4/1 11:52:00

同型半胱氨酸(HCY)測(cè)定試劑盒的使用方法因其具體的測(cè)定方法和試劑盒類型而有所不同。以下是兩種常見的同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒的使用方法:

酶循環(huán)法試劑盒

試劑與樣本準(zhǔn)備

試劑:確保試劑1和試劑2在有效期內(nèi),并按照說明書要求在2~8℃儲(chǔ)存。開口后的試劑在儀器倉(cāng)中(2~8℃)可穩(wěn)定30天。

樣本:采集空腹血清或血漿作為樣本,樣本應(yīng)在低溫條件下運(yùn)輸保存,采集后需冷藏并迅速離心,樣本密封2~8℃下可保存48小時(shí)。如果檢測(cè)延后,需冷藏血清。

樣本處理

如果樣本中HCY含量超過50μmol/L,則用8.5%鹽水稀釋后測(cè)定,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

根據(jù)不同儀器的要求,試劑和樣本用量可按比例改變。通常試劑1用量為185μL,試劑2用量為50μL,樣本用量為10μL。

儀器設(shè)置

使用全自動(dòng)生化分析儀,設(shè)置測(cè)定溫度為37℃,波長(zhǎng)340nm,比色杯光徑1.0cm,測(cè)定模式為速率法,測(cè)定時(shí)間為120秒。

操作步驟

將試劑1和試劑2按照說明書要求加入儀器中。

將樣本加入儀器中,開始測(cè)定。

儀器會(huì)自動(dòng)完成反應(yīng)和檢測(cè)過程,并給出測(cè)定結(jié)果。

結(jié)果分析

根據(jù)測(cè)定結(jié)果,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線或參考值范圍,判斷樣本中HCY的濃度。

如果測(cè)定結(jié)果超出參考值范圍,應(yīng)重新測(cè)定進(jìn)行確認(rèn)。

ELISA試劑盒

試劑與樣本準(zhǔn)備

試劑:確保所有試劑在有效期內(nèi),并按照說明書要求儲(chǔ)存。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液等需在使用前配制。

樣本:采集血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等作為樣本,樣本應(yīng)在低溫條件下保存,避免反復(fù)凍融。

樣本處理

如果樣本中HCY濃度過高,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣本符合試劑盒的檢測(cè)范圍。

加樣與反應(yīng)

按照說明書要求設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。

分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品,然后加入生物素標(biāo)記抗體工作液和辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。

將反應(yīng)板置于37℃恒溫箱中孵育一定時(shí)間。

洗板與顯色

按照說明書要求洗板,去除未結(jié)合的試劑。

向各孔中加入顯色液,避光孵育一定時(shí)間。

加入終止液終止反應(yīng)。

結(jié)果測(cè)定

使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔的光密度(OD值)。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值和濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

通過待測(cè)樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的濃度。

結(jié)果分析

根據(jù)測(cè)定結(jié)果,判斷樣本中HCY的濃度。

如果測(cè)定結(jié)果超出參考值范圍,應(yīng)重新測(cè)定進(jìn)行確認(rèn),并結(jié)合其他臨床信息進(jìn)行綜合分析。

請(qǐng)注意,不同品牌和型號(hào)的試劑盒在細(xì)節(jié)上可能有所不同,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,并按照說明書要求進(jìn)行操作。同時(shí),實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意安全防護(hù),避免試劑濺到皮膚或眼睛等敏感部位。